탯줄 혈액의 조혈 모세포

탯줄 혈액은 조혈 세포의 증식 가능성 및 재 축적 능력에 대한 조혈 줄기 세포의 원천으로 작용합니다. 분만시 탯줄 혈액에는 충분하게 많은 수의 조혈 모세포가 포함되어 있음이 반복적으로 밝혀졌습니다. 일부 저자는 제대혈의 조혈 줄기 세포를 이식하는 이점은 HLA 항원과 호환되는 기증자를 검색 할 필요가 없다고 생각합니다. 그들에 따르면, 신생아의 면역 시스템 원인의 미성숙 이에 따라, 심각한 반응 "호스트 이식편 대"의 발생 골수 이식에 비해 낮은 면역 세포의 기능 활동을 감소. 제대혈 세포의 이식 생존에도 환자 체중 1 ㎏ 당 투여 GSK 작은 수를 사용하는 경우, 골수 세포보다 낮다. 그러나, 우리의 관점에서 질문의 최적의 수는받는 사람, 자신의 면역 학적 호환성 및 혈액이 더 심각한 분석이 필요 제대혈의 조혈 줄기 세포 이식의 다른 측면의 숫자의 몸에 효율적으로 생착에 필요한 제대혈 세포를 이식.

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제대혈 조혈 모세포 획득

제대혈의 조혈 줄기 세포를 얻기위한 절차는 태반뿐만 아니라 제왕 절개에 관해서는, 자궁 또는 전 자궁에있을 때 탄생과 태반에서의 분리, 후 즉시 섭취를 필요로하지만, 또한 전 자궁. 이것은 25-40 ㎖가 평균 30초 제대혈 수득 증가 부피까지 태반 분리에 의해 신생아 출생으로부터 시간을 단축하는 경우에 그렇게 도시되어있다. 나중의 절차로 동일한 양의 혈액이 손실됩니다. 아이를 애프터 레코더에서 조기에 분리해도 신생아에게 부정적인 영향을 끼치 지 않는다는 것이 확인되었습니다.

혈액학 러시아 연구소 및 수혈은 모두 코드 생리 학적 계통에서 혈액 ((70.2 + 25.8) ㎖) 및 제왕 절개 ((73.4 + 25.1) ㎖)에 대한 효과적이고 저렴한 비용으로 기술을 개발했다. 각각 (9.6 + 83.1) 및 (83.4 + 14.1) % - 충분히 높은 단핵 세포 및 핵의 수율 제대혈의 분리 방법. 각각 (+ 96,8 5,7) 및 (89.6 + 22.6) %, - 개선 된 단핵 세포 및 CFU-GM의 높은 안전성을 보장 제대혈의 동결을위한 방법. 컨테이너 "Kompoplast-300"(러시아)를 사용하여 배수 제대혈 샘플링 방법의 효율. 울타리 제대혈 저자는 자궁이나 전 자궁에서 태반을 배치의 측면에서, 탄생과 태반에서의 분리 직후. 70 %의 에틸 알코올 - 두 번 후 5 % 요오드 팅크, 및 처리 한 제대 정맥 제대 천자 전에. 혈액은 연결 튜브를 통해 자발적으로 용기로 흘렀다. 울타리의 길이는 10 분을 넘지 않았습니다. 66 개 모아 배수 용적 방법 탯줄 혈액 샘플 (72 + 28) ml의 평균, 샘플에서 백혈구의 수는 전체 평균 - (1.1 + 0.6) X X 107 멸균 용 제대혈 (박테리아 오염의 분석 출생 태아의 표면을 아래쪽으로, 코드 5 % 나트륨으로 처리 하였다 특별한 프레임 상에 배치 된 후 HIV-1 개만 샘플 간염 B 및 C, 매독 및 사이토 메갈로 바이러스 감염)의 바이러스가 태반을 일단 다른 연구에서 C 형 간염으로의 IgG-항체를 동정 하였다 요오드 및 75 % 에틸 일 알코올. 수혈 시스템 (G16)로부터 배출 바늘 제대 정맥. 혈액이 용기에 자연스럽게 흘렀습니다. 이 방법으로 채취 한 혈액의 양은 평균 55 ± 25 ml입니다. 용지가 Kogler G. 등 (1996), 제대혈 촬영 폐쇄 방법과 혈액 대량 수득 - 평균 (79 + 26)를 용액. 저자는 574 코드 중 혈액 샘플이 이식을 위해 그들을 사용하는 것을 허용하지 않습니다 혈액 40 ml의보다 약 7 % 이하 포함하고 있습니다. K. 이소 야마 등 (1996), 주사기를 이용하여 활성 exfusion 제대혈을 가지고, (15 내지 135 ml의 변화로부터 제대혈 부피) 69.1 ml의 혈액의 평균을 받았다. 마지막 punovinnoy 정맥 카테터 의해 A. 압델 Mageed PI 협력자 (1997)는 제대혈 (56 내지 143 ㎖)에 평균 94 mL를 얻었다.

62.5 ㎖에 함유 널리 사용 transfuzioinoy 시스템 박스터 헬스 케어 주식회사, 디어 필드, IL (USA)에 기초하여 폐쇄 시스템의 혈액 수집을 개발 모체 분비물에 의한 인성 감염 및 오염의 위험을 줄이기 위해, CPDA (아데닌, 시트르산 - 인산 포도당) 등 항응고제. 물질을 얻는 기술은 세포 현탁액의 부피, 함량 및 순도와 관련하여 정성 샘플을 준비하는 데있어 가장 중요합니다. 크게 모세포의 세포 현탁액의 물질의 미생물 오염의 위험뿐만 아니라 오염을 감소시키는 폐쇄 형 시스템에서와 같이 코드 채혈 기존의 방법, 제 폐쇄, 반 개방 개방 시스템 sleduetotdavat 선호도로 분류 kotoryeuslovno.

A. Nagler와 공동 저자 (1998)는 세 가지 제대혈 샘플링 시스템의 효능을 비교 분석했다. 첫번째 변형에서, 절차는 용기 내로의 혈액의 직접적인 배출에 의해 폐쇄 된 시스템에서 수행되었다. 두 번째 변종에서는 제대 정맥을 추가로 세척하고 혈액을 동시에 용기로 흘려 보내는 방식 (주사 방식)으로 주사기 1을 활발히 혈액을 공급하는 방법으로 제대혈을 얻었습니다. 세 번째 변종에서는 혈액을 주사기로 활발히 추출하고 제대 동맥을 통해 세척하여 컨테이너로 동시에 배출함으로써 반 개방 시스템에서 혈액을 회수했습니다. 제 1 실시 예에서, 저자는 백혈구의 함량 (3.6 + 10.5)에서 제대혈 (76.4 + 32.1) 용액 부피에서 얻어진 10 × ^6을 혈액 1 ㎖이다. 제 2 실시 예에서는, 대응하는 수치였다 (174.4 + 42.8) 및 용액 (8.8 + 3.4) × 10 ⁶ / ㎖를; 셋째 - (173.7 + 41.3)의 용액 및 (9.3 + 3.8) × 10 ⁶ / ㎖를. 개방형 시스템을 사용할 때 제대혈 샘플의 가장 빈번한 감염이 나타났습니다. 태반 질량과 추출 된 혈액의 부피 사이의 직접적인 상관 관계가 확립됩니다 - 태반 질량이 증가하면 수집되는 혈액의 양이 증가합니다.

제대혈 샘플링 후 분리 단계는 단핵 세포를 단리하고 적혈구에서 세포 현탁액을 정제합니다. 실험 조건 하에서, 유핵 세포는 염화 암모늄 적혈구의 용해 동안 메틸 셀룰로즈로 침전시키는 방법에 의해 분리된다. 그러나 조혈 줄기 세포의 손실이 50-90 %에 이르기 때문에 임상 목적으로 메틸 셀룰로오스를 사용해서는 안됩니다. 이와 같이 분리의 비율은 CD34 + 표현형 및 선조 세포 CFU-GM 기능 및 CFU-GEMM 상당히 높은하여 세포 핵 있지만, 또한 거의 수행되지는 병원에서 작동 용액의 많은 양에 관련하여 적혈구를 용해시키기. 밀도 구배 구매자 밀도 솔루션 (BDS72)에서 단핵 세포를 분리하기위한 새로운 에이전트가보고되었습니다. 이 물질의 생리 학적 파라미터는 다음과 같습니다 : pH 7.4, 삼투압 280mosm / kg, 밀도 1.0720g / ml. 저자들에 따르면, 그 도움으로 CD34 양성 세포를 100 %까지 분리하고 적혈구를 98 % 제거 할 수 있다고한다. 그러나이 클리닉에서는 아직 BDS72를 적용하지 않았습니다.

제대혈로부터 유핵 세포 시험되는 분리 방법은 일반적으로 10 %의 HES 용액 또는 3 % 젤라틴 용액을 사용한다. 적혈구 침전 효율 및 두 경우 유핵 세포 분리가 대략 동일하다. 그러나 가능하면 침전 에이전트 젤라틴을 사용하는 경우에 HES를 사용하는 경우보다 CFU-GM, 다소 더 큰 수를 얻었다. 인한 조혈 세포 표면 수용체에 흡수 개별적 분획 또는 핵 세포 성 HES 분자 증착함으로써 회수 효율 CFU-GM 불균등 속도의 차이가 시험 관내에서 CFU-GM을 배양 할 때 사용되는 콜로니 자극 인자에 대한 민감성을 차단하는 것으로한다. 그럼에도 불구하고, 두 침전물은 대규모 제대혈 은행을 만들 때 유핵 세포를 분리하는 데 적합 할 수 있습니다.

제대혈의 분리 및 동결 보존 방법은 원칙적으로 말초 혈액의 조혈 줄기 세포 및 성인 기증자의 골수와의 작업에서 사용 된 것과 다르지 않다. 그러나 은행을 위해 많은 제대혈 샘플을 준비 할 때, 분리 방법은 무엇보다도 저렴한 비용이어야합니다. 따라서, 현 시점에서, 불행하게도, 임상 사용을위한 요구는 고립과 제대혈 세포의 냉동 보존의 일상적인 방법을 입증하고 있으며,보다 효과적인하지만 방법은 많은 finansovoemkie의 실험자 남아있다.

전체 평가 기준은 전염 물질을 검출하기 위해 스스로 조혈 세포 수의 요구 사항과 코드 혈액 샘플의 연구에 설립. 제대혈 조혈 세포의 이식을 보호하기 위하여, 전혈 시료 혈행 의해 송신 감염, 유전 질환 주로 조사되어야한다. 몇몇 저자는의 Bruton, 질병 Harlera과 삿대를 젓는 agammaglobulinemia 지중해 빈혈 및 겸상 적혈구 빈혈, 아데노신 데 아미나 결핍과 같은 유전 질환을 진단하기위한 목적으로 제대혈의 연구의 추가 특별한 방법을 추천합니다.

권고 Ticheli L. 등 (1998)에 따르면, 제대혈의 각 샘플에 유핵 세포 SB34 양성 세포 및 CFU-GM의 수를 결정할 필요가 있고, 혈액 그룹 ABO 로듐 회원 자격을 결정하는 HLA 타이핑을 수행한다. 또한,이 시드 HIV 및 CMV 감염 HBsAg에, C 형 간염, HTLY HTLV-I 및 II-(T 세포 백혈병, 인간), 매독, 톡소 플라즈마에 대한 세균, 혈청 학적 검사를 실시한다. 거대 세포 바이러스와 HIV 감염에 대한 중합 효소 연쇄 반응은 필수적입니다.

제대혈을 채취하는 절차는 의학 생의학의 원칙에 따라 엄격히 수행되어야합니다. 혈액 수집을 시작하기 전에 임산부의 동의를 얻어야합니다. 혈액 투상에서부터 문서 작성 완료까지 모든 조작을 수행 할 수 있도록 정보에 근거한 동의를 얻은 임산부와의 예비 인터뷰는 의료진에 의해서만 수행됩니다. 생명 윤리와 인권의 확립 된 규범의 위반의 관점에서 생물, 화학, 제약 및 기타 비 의학 교육과 직원이 절차를 수행하기 어떤 경우에 증거로 채택합니다. 반송 된 HBsAg 양성 시험에서, C 형 간염의 원인균에 대한 항체는 HIV 및 매독 제대혈이 취해지지하고, 수집 된 혈액 샘플은 이미 폐기되고 파괴된다. 이는 신생아 잠복 감염 캐리지 따라서 혈행 전송 제대혈 세포의 조혈 주입 감염성 합병증의 개발 가능성이 성인 공여자 골수 이식의 경우보다 현저하게 낮은, 성인보다 희귀 한 것을 주목해야한다.

병원에서 제대혈의 응용 프로그램의 중요한 점은 제대혈 세포의 샘플에서 조혈 줄기 세포의 정량화 및 이식에 필요한 용량을 기반으로 이식의 평가이다. 이식에 필요한 최적의 제대혈 세포 수에 대한 표준은 아직 개발되지 않았습니다. CD34 양성 세포와 CFU-GM의 수와 같은 일상적인 매개 변수에서도 일반적으로 받아 들여지는 관점은 없습니다. CFU-GEMM - 일부 저자는 과립구, 적혈구, 거핵 세포, 단핵구 및 공통 집락 형성 단위의 내용을 판단하여 장기 배양 분석하여 조혈 세포의 가능성을 평가 하였다.

그러나 임상 환경에서 제대혈 이식의 표준 평가는 대개 핵 또는 단핵 세포 수의 결정 만 포함합니다.

제대혈 조혈 줄기 세포 저장

조혈 줄기 세포를 저장하는 기술에는 몇 가지 문제가 있습니다. 경우 제대혈 이전 용혈 현상을 방지하기 위해 제거 적혈구의 양과 적혈구 항원 (ABO, RH)의 비 호환성 반응의 위험을 최소화해야 최적의 냉동 모드를 달성하기 위해 조혈 줄기 세포의 냉동 보존. 이러한 목적을 위해, 유핵 세포를 분리하기위한 다양한 방법이 적합하다. 밀도 1.080 g / ㎖와 밀도 1.077 g / ㎖, 또는 여과와 피콜에 기초하여 밀도 구배 유핵 세포를 분리하는 가장 널리 사용되는 방법은 지난 세기 90 년대 초반. 밀도 구배에 의해 분리 제대혈 주로 단핵 세포를 선택할 수 있지만, 조혈 전구 세포의 상당한 손실을 초래 - 30-50 %까지.

탯줄 혈액 세포의 분리 과정에서 하이드 록시 에틸 전분의 침전 효율은 다른 방식으로 추정된다. 일부 연구자들은이 방법을 사용하여 낮은 분리 품질을 나타 냈지만 반대로 다른 연구자들은 가능한 모든 방법 중에서 HSC 제대혈을 6 % 히드 록시 에틸 전분 용액을 사용하여 정확하게 분배하는 것을 선호합니다. 이것은 일부 데이터에 따르면 84 %에서 90 %에 이르는 조혈 세포의 높은 침강 효율을 나타냅니다.

적혈구, 백혈구 및 플라즈마 링 : 다른 관점의 지지자들은 거의 모든 분류 프로세스가 큰 손실 yadrosoderzhashih 세포를 포함하고, 원심 분리 3 개 분수에 제대혈을 분리하여 분리를 만들기 위해 제공한다고 생각합니다. 이와 같이 세포를 분리 발명자들은 CD34 +의 면역 표현형과 초기 조혈 전구 세포 및 세포의 단핵 세포의 함유량은 최종적으로 각각 90, 88, 본래 수준의 100 %임을 발견 하였다. 다른 연구자들에 의해 얻어진 제대혈 세포의 정제 방법에있어서 유사 성장 수량 : 침강이 92 %, 98 %가 할당 된 후 핵 - 단핵구, 96 % - CD34 양성 세포 집락 형성 단위 106 %로.

1990 년대 말 젤라틴은 침전제로 널리 사용되었습니다. 임상 실습에서, 젤라틴의 도움으로 제대혈의 조혈 줄기 세포가 1994 년 이래 격리되었습니다. 젤라틴의 3 % 용액을 사용할 때, 유핵 세포의 분리 효율은 88-94 %에 이릅니다. 생성 제대혈 은행에 젤라틴의 광범위한 사용은 퇴적물의 다른 수단을 통해 장점을 확인했습니다. 시험 제대혈 각 시료에서의 연속적인 사용 조건에서는 유핵 세포의 분리의 상기 모든 방법의 비교 분석은 CD34 + / CD45 +,뿐만 아니라 CFU-GM 및 CFU-GEMM의 수만큼 표현형 최적 sedimenter 아웃 단핵 세포가 3 % 인 것으로 나타났다 젤라틴 용액. 이것은 상당히 비효율적 피콜 밀도 구배를 사용하는 방법, 및 조혈 세포 손실이 60 %에 도달하는 메틸 셀룰로오스 및 히드 록시 에틸 전분의 사용을 입증.

줄기 세포 이식의 확대는 생산 방법 개발뿐만 아니라 저장과도 관련이있다. 장기 보관을위한 제대혈의 준비 및 시료에 대한 최적의 저온 보존 기술의 선택과 관련하여 많은 문제가 직접적으로 있습니다. 그 중에는 분리 절차 수행의 편의성, 다양한 저온 저장 매체의 사용, 이식을 위해 해동 된 세포를 준비하는 방법의 사용이 있습니다. 제대혈 샘플의 운송은 종종 혈액 학적 센터와 떨어진 지역에서 이루어집니다. 이와 관련하여, 제대혈을 수령 한 순간부터 저온 보존의 시작까지의 제대혈 보관을위한 허용 기간의 문제가 발생하는데, 이는 제대혈 은행의 개발에 특히 중요합니다.

액체 질소에서 조혈 제대혈 세포 (12 세까지) 후 장기 저장의 기능 활동의 연구는이 기간 동안 조혈 세포의 약 95 %가 높은 증식 능력을 상실하지 않는 것으로 나타났다. 용지 Yurasova S. 등 (1997)은 실질적으로 초기 수준이 적절 92 인 조혈 세포의 생존 능력을 감소시키지 않고 실온 (22 ℃)에서 24 4 ° C 48 시간 동안 저장된 제대혈 입증 및 88 %. 그러나 저장 기간이 3 일로 연장되면 제대혈에서 생존 가능한 핵 세포 수가 현저히 줄어 듭니다. 동시에, 다른 연구 22 ° C 또는 (4)의 온도를 2-3 일 동안 보관시 주로 조혈 세포 성숙 과립구의 생존에 영향을 아닌 것을 발견했다.

제대혈의 생존에 조혈 줄기 세포는 컬렉션에 시스템 구성 요소의 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다. 동작기구는 24 내지 72 시간의 제대혈 보관 조건에서 조혈 전구 세포 칼슘 이온 (ACD, EDTA, XAPD-1)의 결합에 의한 다른 항응고제의 효과 분석 유핵 세포의 생존에 미치는 부정적인 영향을 밝혔다. 이와 관련하여, 저자들은 의견 것이 가능 72 시간 저장 분획 제대혈까지의 지속 시간을 증가시킬 수있게하고 집락 형성 단위의 기능적 활성을 저장, 20 U / ㎖의 농도로 방부제없이 천연 헤파린 첨가 한 PBS (인산 완충 용액)의 사용을 추천한다. 그러나, 보존 CFU-GM 및 CFU-G의 연구에서 9 시간 초과하지 않아야 동결 전에 그 제대혈 축적 시간을 도시. 물론,이 경우이 경우 충돌 데이터가 최소 권장 제대혈 보관 수명을 사용하고 가능한 한 빨리 프로그램 동결 분리 된 세포를 시작해야한다는 원칙을 행동해야합니다.

조혈 줄기 세포의 제대혈을 동결시킬 때, 일반적으로 10 % DMSO 용액이 동결 방지제로 사용됩니다. 그러나, 표현 된 cryoprotective 효과 이외에,이 농도의 dimethylsulfoxide는 심지어 제대혈의 혈액 형성 세포에 최소한의 노출 조건 하에서 직접 세포 독성 효과가 있습니다. DMSO의 세포 독성 효과를 줄이기 위해 제로 노출 온도, 모든 조작의 속도 증가 및 제대 시료 해동 후 반복적 인 세척이 적용됩니다.

우크라이나의 의과학 및 혈액 의학 연구소는 1995 년 이래로 줄기 조혈 세포의 대체 공급원으로 제대혈을 연구하는 과학적 방향을 발전시켜 왔습니다. 특히, 비 분획 화 및 분획 화 된 제대혈의 조혈 세포의 저온 냉동 보존을위한 새로운 기술이 개발되었다. 동결 방지제로서, 저 분자량 의학 폴리 비닐 피 롤리 돈이 사용된다. 미분 획 혈액 제제의 동결 보존 방법은 동결 용 세포 사전 조제 기술과 이식 직전에 세포 현탁액을 특수 처리하는 기술을 기반으로합니다.

저온 조혈 줄기 세포의 기능적 활성 수준에 영향을 미치는 가장 중요한 요인 중 하나는 세포 현탁액의 냉각 속도, 특히 결정화 단계 동안이다. 동결 속도 및 시간 문제를 해결하기위한 소프트웨어 접근 방식은 이식 전에 동결 방지제에서 세포 현탁액을 씻지 않고 간단하고 매우 효과적인 저온 냉동 방법을 만드는 데 큰 기회를 제공합니다.

즉각적인 동결 및 해동의 단계는 준비 과정에서 세포의 생존 가능성에 가장 위험합니다. 조혈 세포를 동결시키는 경우 세포 간 배지가 액체에서 고체상으로 전환되는 순간에 상당 부분이 파괴 될 수 있습니다. 세포 사멸의 비율을 줄이기 위해 cryoprotectants가 사용되며, 그 작용 메커니즘과 cryoprotective effective는 과학 문헌에서 적절히 다루어 져 왔습니다.

골수 및 제대혈 세포의 냉동 보존 유망한 방향 최적화 기법은 세포 바깥 효과를 갖는 세포 내 DMSO의 레벨 및 히드 록시 에틸 전분 또는 알부민에 작용하는, 예를 들어, 동작의 여러 메커니즘 cryoprotectants 저농도 동일한 용액에서 결합된다.

제대혈 세포의 냉동 보존 전통적 영구적 기계적 빙욕에서 교반되고 20 % DMSO 용액을 사용 들어 천천히 달성 세포 현탁액에 붓고 동일한 1 : 1의 세포 현탁액 및 동결 방지제의 체적비. 디메틸 설폭 사이드의 최종 농도는 10 %이다. 그런 다음 세포 현탁액을 HS / min ~ -40 ° C의 속도로 소프트웨어 저온 유지 장치에서 냉각시킨 후 냉각 속도를 10 ° C / 분으로 증가시킵니다. -100 ° C에 도달 한 후 세포 현탁액이 담긴 용기를 액체 질소 (-196 ° C)에 넣습니다. 이 동결 보존 방법을 사용하면 해동 후 기능적으로 활성 인 단핵 세포의 안전성이 초기 수준의 85 %에 도달합니다.

저온 보존 방법의 변경은 하이드 록시 에틸 전분을 첨가하여 DMSO의 농도를 감소시키는 것을 목적으로한다 (디메틸 술폭 시드 및 하이드 록시 에틸 전분의 최종 농도는 각각 5 % 및 6 % 임). Cryoprotectants의 조합의 높은 효율은 골수 세포의 현탁액이 동결 될 때 관찰되며, 디메틸 설폭 시드의 단일 10 % 용액보다 세포 보호가 적습니다. 생존 가능한 핵 세포의 수는 기준선 수준의 96.7 %에 이르렀으며 CFU-GM 수에 의해 추정 된 기능 활성은 81.8 %였다.

5 내지 4 % 하이드 록시 에틸 전분 (최종 농도)와 함께 10 % 범위의 농도로 디메틸 설폭 사이드 용액을 사용하면 이러한 범위의 CD34 양성 세포의 보존 실질적 디메틸 설폭 변경하였습니다. 12.2 %에서 85.4로 감소 생균 단위 수 - 5 내지 2.5 %의 DMSO의 농도를 감소시키는 상태에서 동시에 질량 제대혈 세포 사멸을 관찰된다. 최대 효율 제대혈 HSC의 동결시 세포 보호를 제공 - 다른 저자는 또한 (자가 혈청과 함께 저작권 실시 예에서), 디메틸 설폭 사이드 (5) 10 % 용액이라고 결론 지었다. 특히 TOS / 분의 제어 된 냉각 속도뿐만 아니라, 높은 안전성 순차적 냉동 및 해동 된 세포는 5 또는 10 % DMSO 4 % 하이드 록시 에틸 전분의 용액을 조합하는 경우에 표시된다. 다른 이미 세 가지 성분으로 이루어진 cryoprotective 용액을 사용 논문 - 1의 비로 DMSO, 정제 된 인간 알부민 및 RPMI 배지 : 4 : 동량의 비율로 세포 현탁액까지 가하고 5 (최종 DMSO 농도가 5 %였다). + 4 ° C의 수조에서 제상 한 후 CFU-GM의 안전성은 94 %를 초과했습니다.

일부 저자는 적혈구를 제거하는 동안 상당한 양의 조혈 세포가 손실되기 때문에 비분 해 된 제대혈을 저온 보존에 사용할 것을 제안합니다. 이 구체 예에서, 디메틸 술폭 시드의 10 % 용액은 단결정 화의 손상 효과로부터 단핵 세포를 보호하기 위해 사용된다. 냉동은 HS / min ~ -80 ° C의 일정 냉각 속도로 실시한 후 제대혈 세포 현탁액을 액체 질소에 담근다. 이 동결 방법을 사용하면 적혈구의 부분 용해가 일어나 혈액 샘플에 분획이 필요하지 않습니다. 해동 후, 세포 현탁액은 인간 알부민 용액 또는 환자의자가 혈청에서 유리 헤모글로빈 및 디메틸 설폭 시드로부터 세척되고 이식에 사용된다.

미분 획 제대혈을 해동 후 조혈 전구 세포의 보존은 분별보다 실제로 더 높은이지만, 적혈구의 krioustoychivostyu과 관련하여 ABO 호환되지 않는 적혈구 수혈 후 수혈의 결과로 심각한 문제가 발생할 수 있습니다. 또한, 저장된 미분 획 혈액의 양이 현저히 증가합니다. 임상 적 관점에서, 조혈 줄기 세포의 다른 세포 분획으로부터 미리 단리되고 정제 된 것을 여전히 저온 보존하는 것이 바람직하다.

특히, 방법은 조성물 plazmozameshchath 용액 "Stabizol"히드 록시 에틸 전분의 6 % 용액을 사용하여 동결 대비하여 적혈구를 제거 가능 분획 제대혈 세포의 냉동 보존이다. 해동 후, 이와 같이 수득 된 세포 현탁액은 추가적인 조작없이 임상 적으로 사용될 준비가된다.

따라서, 현재 제대혈의 동결 보존에 대한 많은 효과적인 방법들이있다. 가장 큰 차이점은 혈액 샘플은 냉동 단계에서 분획되지 않았거나 준비 단계에서 세포 분획으로 분리되어 적혈구가 섞이지 않고 유핵 세포가 채취된다는 것입니다.

제대혈 혈액 조혈 줄기 세포 이식

80 년대 후반 - 지난 세기의 90 년대 초반에 임신 중에 태아에게 공급되는 제대혈은 조혈 줄기 세포의 함량이 높다는 것이 발견되었습니다. 탯줄 혈액 세포를 얻는 것이 상대적으로 단순하고 윤리적 인 문제가 없다는 것은 실용 의학에서 제대혈 줄기 세포의 사용을 촉진시켰다. Fanconi 빈혈이있는 어린이에게 제대혈을 성공적으로 이식 한 것은 제대혈 줄기 세포 이식의 양을 늘리고 은행 기금 마련을위한 시스템을 만드는 출발점이되었습니다. 제대혈 은행의 글로벌 시스템에서 가장 큰 것은 뉴욕 보건 센터 (National Center of Health)의 대차 대조표에있는 Placentental Blood 용 뉴욕 센터입니다. 이 은행에 저장된 코드 혈액 샘플의 수는 20 LLC에 접근하고 있습니다. 수혜자 (주로 어린이)의 수 또한 증가하고 성공적인 이식이 수행되었습니다. 미국 보건부에 따르면 HSC 제대혈을받는 사람의 이식 후 삶의 재발이없는 기간은 이미 10 년을 초과했습니다.

제대혈의 조혈 가능성의 수많은 연구가 초기 줄기 세포의 수량과 품질뿐만 아니라 성인 인간 골수 열등없는 것으로 나타났습니다하지만 몇 가지 조치를도를 초과하여 이것은, 놀라운 일이 아니다. 제대혈 줄기 세포의 이상 증식 전위는 특정한 성장 인자에 조혈 모세포상의 수용체의 존재는, 제대혈 세포의 용량은 성장 인자, 대형 및 텔로미어의 길이의 생산 분비하는 발전 셀 시그널링 기능을 일으켰다.

따라서,받는 사람의 제대혈 미리 결정된 품질 생착 높은 잠재적 기증자의 조혈 회복의 조혈 줄기 세포의 게놈과 표현형 기능을 제공합니다.

제대혈의 조혈 줄기 세포의 장점

전신 마취의 필요성을 제거하면서, (예를 들면 태반으로 간주하지 않은 경우) 기증자의 건강에 거의 제로 위험을 유의해야한다 조혈 세포의 다른 소스를 통해 이식 된 조혈 코드 혈액 줄기 세포를 사용하는 실제 혜택 중. 제대혈 세포 이식의 사용은 부분적으로 HLA-그래프트 호환 시스템 (호환성에서 1 내지 3 개의 항원)으로 인하여 확장된다. 희귀 HLA 타입을 획득하는 확률을 증가시키고, 서치 시간 HLA 일치 동종 이식을 줄여 냉동 상태에서 제대혈 조혈 세포의 장기 보존 방법. 동시에, 전송 경로에 의해 전송되는 잠재적 인 감염을 개발할 위험이 크게 줄어 듭니다. 또한자가 이식을 위해 제대혈 세포를 사용할 가능성과 관련하여 저렴한 생명 보험 형태가 있습니다.

그러나, 이물 태반 (더 (100)보다 용액의 평균) 제대혈 유래 시료의 세균 오염의 위험을 최소화의 조건을 엄격하게 준수 탯줄 정맥에서 혈액의 가능한 최대 크기를 구하는 문제로 수집 될 수 혈액 소량 때문이다.

제대혈로부터 조혈 원시 세포는 일반적으로 그 표면 glikofosfoproteina CD34의 존재에 의해 식별하고, 시험 관내에서의 클론 원성 분석 또는 콜로니 형성을 검사하여 자신의 기능적 특성에 기초한다. 비교 분석 분획에서 CD34 양성인 단핵 세포 제대혈 골수 최대 함량 CD34 + 세포의 하위 집단에서 집락 형성 단위의 1.6 및 5.0 %, 최대 레벨 각각 것으로 나타났다 - 80 25 % CD34의 총 클로닝 효율 + β- 세포 - 88, 58 % (-populyatsii의 CD34 +의 HPP-CFC) 높은 세포 증식 잠재력 형성 최대 콜로니 - 50 6.5 %를. CD34 + CD38 세포와 능력의 복제 효율이 제대혈의 조혈 줄기 세포에서 또한 높은 사이토 카인 자극에 반응하는 것을 추가해야합니다.

조합 표현형 항원 네-1, CD34 및 CD45RA들은 줄기 세포에 속하는 것을 나타내는 제대혈 세포의 표면에있는 세 개의 항원의 높은 증식 제대혈 조혈 세포의 능력 및 발현을 확인한다. 또한, 제대혈에는 선형 분화 마커가없는 CD34 + 표현형 세포가 포함되어 있다는 것이 확인되었습니다. CD34 + / Lin의 표현형 프로파일을 가진 세포 subpopulation의 제대혈 수준은 CD34 양성 세포의 총 수의 약 1 %입니다. 조혈 모세포 혈액 전구체 세포는 림프 성 세포주와 다 능성 골수 이형 줄기 세포의 분화를 유도하며 줄기 세포에 속하는 것으로 나타납니다.

이미 언급했듯이, 골수와 제대혈의 근본적인 차이점은 하나의 절차로 얻은 이식에 사용되는 조혈 세포의 양입니다. 골수 이식 분리 공정, 동결, 해동에 균체의 손실 및 테스트 40-50 % 범위로 허용되는 경우, 제대혈 세포와 같은 손실이지지 할 수있다 HSC 이식의 충분한 수를 사용하면되므로, 매우 중요하다. 10kg 전위 이식 (수집 된 제대혈 표본의 수 - 2098)의 수신자 체중 세포 이식 G. Kogler 등 (1998)에 따르면, - 67 %, 단지 모든 제대혈 샘플, 체중 35kg 수있다 표본의 25 %는 체중이 50-70kg 인 환자에게 효과적인 이식을 제공 할 수 있습니다. 이 임상 상황은 제대혈 세포 샘플링, 복제 및 보관의 기존 방법의 효율성을 최적화하고 향상시킬 필요성을 나타냅니다. 따라서, 샘플링 방법, 테스트, 분리 및 제대혈의 냉동 보존의 표준화의 문제는 이제 널리 혈액 은행, 병원에서의 사용의 생성뿐만 아니라 조건과 제대혈의 조혈 줄기 세포의 보관 조건을 설정하기위한 문헌에서 설명합니다.

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제대혈 조혈 줄기 세포의 의약품에의 사용

일반적으로 제대혈 줄기 세포 는 최대 10 ^{6 개} 까지 제대혈에서 분리 할 수 있습니다 . 이와 관련하여, 오늘날까지, 많은 수의 조혈 줄기 세포가 성인 수령자의 조혈을 회복시킬 수있는 충분한 양의 문제가 남아 있습니다. 이 사안에 대한 의견은 분열되었습니다. 일부 연구자들은 (7-10) 10 ×이 금액은 정부가 최적있는 성인 인간을 이식하는 이식 아동을위한 충분하지만 너무 작다는 사실을 믿고 ⁶ 7 × 10의 평균 - 체중 1kg 당 CD34 양성 세포 ⁽⁸⁾ 이식 당. 이러한 계산에서 하나의 제대혈 샘플은 성인 환자에게 한 번 이식하는 데 필요한 것보다 조혈 줄기 세포가 700 배 적다는 결론을 얻었습니다. 그러나 그러한 양적 평가는 골수에서 수혈 된 세포의 수와 유사하게 만들어지며 조혈의 발생 기작을 완전히 무시합니다.

특히, 제대혈의 조혈 줄기 세포의 증식 가능성이 높다는 사실은 골수의 조혈 전구 세포와 비교하여 무시된다. 시험관 내에서 식민지 형성 가능성에 대한 연구 결과는 한 제대의 제대혈이 성인 수령자의 조혈 재구성을 제공 할 수 있음을 시사한다. 탯줄 혈액에서 CD34 양성 세포의 컨텐츠를 선형 적으로 임신 40 주 (임신의 조기 종료의 경우에서 얻어진 연구를위한 혈액) 20주의 기간에 5 시간을 감소 : 다른 한편으로, 우리는 조혈 모세포 수가 심지어 배아 발달 과정에서 감소한다는 것을 잊지 말아야 (생리 기간), 선형 세포 분화 마커의 발현이 평행하고 지속적으로 증가한다.

제대혈 샘플에서 전구 세포를 정량화하기위한 표준화 된 접근법이 없기 때문에 조혈 모세 혈관 줄기 세포의 최적 용량에 대한 논란이 계속되고있다. 일부 연구자들은 수혜자의 체중에 따라 재 계산 된 유핵 세포와 단핵 세포의 수, 즉 복용량이 제대 표본 선정 기준으로 사용될 수 있다고 생각합니다. 일부 저자는자가 면역 이식을 시행하는 경우에도 CD34 + 세포의 최소 정량 한계가 2 x 10 ⁶ / kg이라고 생각합니다. 5 × 10의 조혈 세포의 투여 량의 증가 ⁶ 세포 / kg (2.5 합계)가 이미 초기 이식 후 기간보다 적합한 제공 감염성 합병증의 발병률을 감소시키고 예방 항생제 치료 기간을 단축시킨다.

제대혈 세포의 성공적인 이식 혈액학 Gluckman E. 등 (1998)에 따르면, 적어도 37 × 10의 소개 ^{7 개} 수신자 1kg의 체중 당 유핵 세포. 1 × 10으로 조혈 줄기 세포의 투여 량을 감소시켜 ⁷ 또는 환자 극적 이식 실패 암 재발 혈압 증가의 위험 1kg의 체중 당 유핵 세포 이하이다. GSG 동종 이식 후 조혈의 급속 회복에 필요한 전구 세포의 최소 수는 아직 알려지지 않았다. 이론적으로는 이는 단일 셀을 사용하여 수행하지만, 임상 골수 이식 생착 빠르고 안정적인 보장 수혈 적어도 (1-3)에 10 × 수 ⁸ 환자 체중 1 ㎏ 당 유핵 세포.

Oncohematology에서 HSC의 최적 양을 결정하기위한 최근의 상세한 연구는 이식 재료에서 CD34 양성 세포의 함량에 따라 분리 된 세 그룹의 환자 관찰을 포함했습니다. 환자는 10 × 첫번째 군 (3-5)을 투여 ⁶ 세포 / kg. 두 번째 그룹의 환자들에서 GSK 도즈 × 10 개 (5-10)에 달했다 ⁶ / kg 세포보다 10 × 10 이식 환자의 제 3 그룹 ⁽⁶⁾ CD34 + 세포가 / kg. 최상의 결과 (3-5)과 동일 하였다 CD34 양성 세포의 수 그래프트 치료받는 군에서 관찰 된 10 × ⁶ / kg한다. 5 × ¹⁰⁶ / kg 이상의 이식 된 세포의 투여 량 증가로 통계적으로 유의 한 효과는 확인되지 않았다. 동시에, 이식에서 매우 큰 HSC 함량 (> 10 x 10 ⁶ / kg)은 상당한 수의 잔여 종양 세포의 재관류와 연관되어 있으며 이는 질병의 재발로 이어진다. 이식 된 동종 조기 세포의 수와 "이식편 대 숙주 (graft versus host)"반응의 발달간에 직접적인 관련성은 없었다.

HSC 제대혈을 이식 한 누적 된 세계 경험은 높은 재 축적 잠재력을 확인시켜줍니다. 제대혈 이식의 생착율은 도입 된 핵 세포의 수와 관련이 있습니다. 가장 좋은 결과는 3 x 10 ⁷ / kg 의 이식에서 관찰되는 반면, 골수의 경우이 용량은 2 x 10 ⁸ / kg입니다. 조정 센터의 자료에 따르면, 2000 년 말에 제대혈 세포의 1200 건의 이식이 주로 기증자 친척 (83 %)에서 이루어졌습니다. 분명히 제대혈은 hemoblastoses 환자에게 이식하기 위해 골수에 대한 대안으로 간주되어야합니다.

그러나, 조혈 조직의 신생아 성격 코르도바 소스 인해 GCW의 기능적인 특징의 존재에 격려. 그러나, 임상 경험은 조혈의 무형성과받는 사람의 성인 조혈 재구성을위한 탯줄 혈액 샘플의 적절성의 질문에 대한 답변을 제공 할 수 있습니다. 백혈병 및 골수이 형성 증후군, 비호 지킨 림프종, 신경 모세포종, 재생 불량성 빈혈, 선천성 판 코니 빈혈과 다이아몬드 블랙 팬, 백혈구 접착, 바 증후군, 군터 질병 Harlera 증후군, 지중해 빈혈의 결핍 : 제대혈 세포의 이식은 많은 종양과 비 종양 성격의 질병의 치료에 사용된다 .

밀접한 관심과 별도의 연구가 제대혈의 혈액 형성 세포 이식의 면역 학적 측면에 부합해야합니다. 이는 골수보다 낮은 면역의 제대혈을 나타내는 저자에 따르면, 완전 HLA 일치 이식 결과 공여자 제대혈 조혈 모세포 이식의 경우, 그 매우 양호한 것을되어 도시된다.

제대혈의 세포 조성물의 자세한 연구는 반응의 상대적으로 낮은 위험 "호스트 이식편 대"와 조혈 모세포 소스로 제대혈을 고려 할 수 있도록 면역 시스템 및 기능적 활동의 이펙터 세포의 양 표현형 스펙트럼의 특징을 보여 주었다. 면역 능력이있는 제대혈 세포의 기능적 미성숙의 징후 중 하나는 사이토 카인 생산의 불균형과 면역 반응의 사이토 카인 조절 민감성의 감소를 주목해야한다. 세포 독성 림프구 활성의 결과적인 억제는 이식 된 조혈 조직에 대한 면역 내성의 형성에 기여하는 인자로 고려된다. 탯줄 혈액 림프구 집단에서는 말초 혈액과 성인 기증자의 골수와 달리 불활성, 미성숙 림프구 및 억제 세포가 우세합니다. 이것은 면역 반응에 대한 제대혈 T- 림프구의 감소 된 사용성을 나타냅니다. 제대혈 세포의 단핵 세포 집단의 중요한 특징은 기능적으로 완전하고 활동적인 항원 제시 세포의 함량이 낮다는 것이다.

이러한 기능은 기증자와받는 사람 세포와 면역 갈등의 강도의 감소를 할 수 있기 때문에 한편, 제대혈 수치의 면역 체계의 이펙터 세포의 성숙의 낮은 정도, 병원에서의 사용을 확장합니다. 그러나, 다른 한편으로는, 우리는 이식의 항 종양 효과, 즉, "이식편 대 백혈병 '의 개발의 효과 반응"이식편 대 숙주 병'의 정도 사이에 상관 관계의 존재를 알고있다. 이와 관련하여, 제대혈 세포의 항 종양 세포 독성에 대한 연구가 수행되었다. 결과는 처음에 활성화 된 항원 자극에 제대혈 세포의 정말 약화 된 면역 반응에도 불구하고 적극적으로 항 종양 세포 독성의 구현의 메커니즘에 관여하는 자연 살해 세포와 killeropodobnymi 세포는 것을 나타냅니다. 더욱이, 제대혈 림프구 아 집단에서 표현형 CD16 + CD56 + 및 CD16 발견되었다 "TCRa / 병렬 +. 이들 세포는 활성화 된 형태로 반응이 구현되는 것으로 가정한다" "이식편 대 백혈병.

우크라이나의 의료 과학 종양학 연구소, 아카데미에서 제대혈에서 냉동 보관 조혈 세포에 의한 화학 요법과 방사선 치료에 조혈의 지속적인 형성 부전과 암 환자에 투여 하였다. 영구 말초 혈 성숙한 형성 소자 상승뿐만 아니라 세포 및 체액 면역 상태를 특성화 지표의 증가에 의해 입증되는 바와 같이 환자에서는 제대혈의 조혈 줄기 세포의 이식을 효과적으로 피 압박 복원. 탯줄 혈액의 혈액 형성 세포를 이식 한 후 재 축적 효과가 안정되어 치료 과정을 중단하지 않고 방사선 및 화학 요법을 계속할 수 있습니다. 효율성 동종 줄기 세포 코드 혈액 암 환자의 증거가있다 : 그들의 사용에 종양의 재발의 연간 위험은 이식 동종 골수 유전자를 가진 환자의 25 % 40 % 대였다.

냉동 보관 된 제대혈 줄기 세포의 작용 기전은 조혈 성장 인자의 생산을 분비하는 신생아 세포의 독특한 능력뿐만 아니라, 확인 등 기증자 세포의 임시 생착의 결과 (에 의한 조혈받는 사람의 체액 성 자극의 결과로 고려되어야한다 - 말초 혈액 태아 헤모글로빈받는 사람 7-15의 내용이 크게 증가 베이스 라인에 비해 수혈 후 일째). 제대혈 후 수혈 반응의 수신자의 부재 - 상대적 면역 세포의 내성뿐만 아니라, 신뢰의 기준 냉동 보존 된 생물학적 물질의 유용성의 결과.

선조 세포 T 후속 이식 면역 요법에 대한 항암 세포 독성 림프구 세포를 유도하는 생체 새로운 생체 내 방법을 개발하는 데 사용되는 외인성 사이토킨 자극의 영향 활성화 킬러 제대혈이 가능한 림프구. 또한, 제대 혈액 면역 세포의 게놈의 "미성숙"는 분자 모델링에 의해 항 종양 활성을 향상시키기위한 이들의 사용을 허용한다.

오늘날 제대혈은 주로 소아 혈액학 분야에서 폭넓게 응용되고 있습니다. 골수 동종 이식에 비해 제대혈의 조혈 줄기 세포의 급성 백혈병의 동종 이식 어린이에 크게 반응의 발생 "호스트 이식편 대"를 줄일 수 있습니다. 그러나 호중구 감소증과 혈소판 감소증이 더 오래 지속되며, 불행하게도 이식 후 100 일이 지나면 사망률이 높아집니다. 방사성 로다 민과 그 표면에 CD38 항원의 낮은 발현 흡수의 로우 레벨에 의해 입증되는 바와 같이 말초 혈액 과립구 및 혈소판 회수 장기간 인해 제대혈의 CD34 양성 세포의 개별 개체군 불충분 분화 될 수있다.

동시에 인해 호환 관련이없는 골수 기증자 모두의 부족뿐만 아니라자가 HSC를 동원 할 수있는 기회를 수행 성인 환자의 탯줄 혈액 조혈 줄기 세포의 이식 30 세 미만의 환자에서 높은 연간 재발 생존율을 보였다 (73 %) . 확장받는 사람의 연령 범위 (18~46년)의 53 %에 생존을 감소.

표현형 CD34 + 골수 및 제대혈과 세포의 정량 분석 골수 높은 (3.5 배)의 콘텐츠를 보였으 제대혈 CD34 + HLA-DR .Izvestno의 표현형 프로필 chtokletkikrovisimmunologicheskimi 마커 CD34과 세포의 상당한 우위를 보였다 시험관 내에서 조혈 세포의 장기 배양의 성장 실험 연구에서 확인 된 HLA-DR +는 면역 표현형 CD34 + HLA-DR + 세포와 이상 증식 활성. 표현형 CD34 + CD38와 원시 세포 전구 세포는 제대혈과 골수에 포함되어 있지만, CD34 + CD38 설정 마커와 제대혈 세포는 성인 기증자의 골수에서 분리 같은 표현형의 조혈 세포,보다 높은 클론 원성 활성을 갖는다. 또한, CD34 + CD38의 면역 표현형과 제대혈 세포는 사이토 카인 (IL-3, IL-6, G-CSF) 자극에 반응하여 증식하는 것 및 골수 세포보다 장기 배양 7 배 콜로니를 재현.

제대혈 줄기 세포 은행

적절한 실제 의학의 새로운 분야의 개발을위한 - 조혈 골수 줄기 세포의 이식을 수행하기 제대혈 줄기 세포 이식뿐만 아니라, 당신은 이미 미국과 유럽에 설립되어 혈액 은행의 광범위한 네트워크를 가지고 있어야합니다. 제대혈 은행의 주내 네트워크는 Netcord Bank Association에 의해 통합되어 있습니다. 제대혈 은행의 국제 관계를 수립의 타당성는 관련이없는 이식이 HLA-동일한 기증자를 선택할 수 있도록 입력 된 제대혈의 많은 샘플을 필요로 수행 할 수있는 사실에 의해 결정됩니다. 다른 HLA 유형의 혈액 표본을 보관하는 은행 체계를 설립하는 것만으로도 기증자를 찾는 문제를 실제로 해결할 수 있습니다. 이러한 제대혈 시스템의 조직은 현재 국제 수준에서 논의되고있는 윤리적 및 법적 규범의 예비 개발을 필요로합니다.

우크라이나에서 제대혈 은행을 만들려면 여러 가지 조항과 문서를 마련해야합니다.

우선, 이것들은 제대혈의 채취, 분류 및 동결 방법을 표준화하는 문제입니다. 성공적인 윤회를 보장하는 제대혈의 최소량을 결정하기 위해 의료 윤리의 요구 사항에 따라 출산 병원에서 제대혈을 채취하는 규칙을 규제해야합니다. 이것은 비교 품질 평가 및 조혈 전구 세포뿐만 아니라 HLA 타이핑 방법 및 탯줄 혈액 세포의 주입에 의해 전달 될 수있는 유전 적 및 전염성 질병의 진단 방법의 다수의 상이한 기준의 표준화는 일반적인 선택 기준 건강한 기증자를 설정한다. 또한 제대혈에서 추출한 혈청, 세포 및 DNA를위한 별도의 저장 시설을 만드는 것에 대해서도 논의 할 필요가 있습니다.

골수 기증자 기록부와의 관계를 구현하기 위해서는 제대혈 데이터의 컴퓨터 네트워크를 구성하는 것이 절대적으로 필요합니다. 세포 이식 기술을 발전시키기 위해 HLA가있는 친척이나 관련없는 공여자의 제대혈 및 골수 이식 결과를 비교하기위한 특별 프로토콜을 개발해야합니다. 제대혈 세포의 임상 적 적용에 대한 윤리적 및 법적 문제의 해결에있어서, 부모의 정보에 입각 한 동의를 포함하는 서류의 표준화 및 아동의 유전 및 / 또는 전염성 질병에 관한 어머니 또는 친척의 통보가 도움이 될 수 있습니다.

우크라이나 세포 이식의 발전을위한 결정하는 조건은 줄기 세포의 기증과 세계 기증자의 골수 협회 (WMDA), 국립 미국 기증자의 골수 프로그램 (NMDP)와 다른 레지스터를 통해 다른 국가들과의 국제 협력의 발전을위한 국가 프로그램의 채택이 될 것입니다.

제대혈의 조혈 줄기 세포 이식의 여전히 짧은 역사를 일반화, 우리는 70 년대 초에 만들어진 제대혈의 임상 적용의 가능성의 첫 번째 가정은, 1988 년에 80 년 동안 동물 실험 연구의 결과를 확인하고,하고 있습니다 올해는 인간 제대혈의 조혈 세포의 세계 최초의 이식을 실시하고 제대혈 은행의 글로벌 네트워크를 개발하기 시작했습니다. 십년 후, 이식 된 조혈 세포, 그 중 800에 제대혈 가까이 환자의 수는 각종 종양 질환 (백혈병, 림프종, 고형 종양)과 비 종양 (선천성 면역 결핍, 빈혈, 대사 이상 질환) 자연과 환자들이었다.

제대혈에서 초기 및 헌신 세포 전구 세포의 함량은 성인의 말초 혈액보다 높습니다. 과립구 - 대 식세포 콜로니 형성 단위의 수와 이들의 증식 가능성에 의해, 성장 인자의 투여 후에도 제대혈은 성인의 말초 혈액을 상당히 초과한다. 체외에서 장기 세포 배양에서 골수 세포보다 제대혈 세포의 증식 활성 및 생존력이 더 컸다. 제대혈 줄기 세포 이식의 중요한 순간 조혈 잠재적 인 수와 유핵 세포, 거대 세포 바이러스 감염, HLA 호환 기증자와받는 사람, 체중 및 환자의 연령의 존재이다.

그럼에도 불구하고, 특히 어린이에서 심한 혈액 질환을 치료하기 위해서는 제대혈의 줄기 세포 이식이 골수 이식의 대안으로 고려되어야합니다. 제대혈 세포의 이식의 임상 적 문제가 점차 해결 - 이미 매우 효율적인 샘플링 기법, 분리 및 제대혈 세포의 냉동 보존이있는 제대혈 은행의 형성 조건을 제공, 시험 방법은 유핵 세포를 향상된다. 은행을 만들 때 탯줄 혈액의 조혈 줄기 세포를 대량 조달하여 분리하는 데는 3 %의 젤라틴 용액과 6 %의 하이드 록시 에틸 전분 용액을 고려해야합니다.

Perehrestenko P. 등 (2001)은 당연히, 제대혈 줄기 세포 이식 GSK 코드 혈액이 채취의 상대적 용이성 중요한 그 중 중요한 장점, 상이한으로 다양한 기원의 조혈의 우울증을 극복하는 복합 치료 방법에 제자리를 취해야 지적 기증자, 바이러스 및 이식의 상대적으로 낮은 비용으로 신생아 세포의 낮은 오염 위험이 없다. 몇몇 저자들은 골수 세포보다 덜 빈번 제대혈 세포의 이식이 그들의 관점에서, HLA-DR 항원과의 제대혈 세포에서 약한 발현 의한 "숙주 대 이식편"반응과 관련된 합병증을 동반 제안들이 미숙. 그럼에도 불구하고, 제대혈의 유핵 세포의 주 인구 내용이 성인 말초 혈액의 20 % 이하 50 % 정도이며, T 림프구 (SDZ 양성 세포)하지만, 이들의 T 세포의 아 집단의 표현형 차이는 소스는 무시할 수 있습니다.

직접 탯줄 혈액 줄기 세포 이식의 생존에 영향을 미치는 요인 중, 우리는 환자 (최상의 결과 5 년까지 세 수신자에서 볼 수 있습니다), 질병의 조기 진단의 연령과 백혈병의 형태 (효율 급성 백혈병에 상당히 높다)을주의해야한다. 중대한 중요성의 핵 생성 된 제대혈 세포의 복용량뿐만 아니라받는 사람과의 HLA 호환성. 단지 29 % - 관련없는 이식 반면, 일년이 경우 무병 생존율은 63 %에 도달 : 그것은 종양학 및 혈액학의 제대혈 이식 GSK의 임상 효능의 우연 분석 관련 이식을 이용하여 치료의 가장 좋은 결과를 보여줍니다이다.

따라서, 제대혈과 높은 repopulyatsionnaya 능력 신생아 조혈 줄기 세포에서 줄기 세포의 많은 수의 존재는 혈액 악성 종양 환자에서 동종 이식에 적합합니다. 일반적으로 6개월 후, 말초 혈액 호중구의 복원 내용은 일반적으로 6 주간의 끝으로 발생하고 혈소판 감소 현상이 사라 그러나, 제대혈의 조혈 줄기 세포 이식 후 조혈의 재현부는 "시간이 늘어"있습니다. (23)에서 각각 관찰 급성 및 만성 반응 "호스트 이식편 대"의 심각한 물론받는 사람의 25 % : 또한, 제대혈의 미성숙 조혈 세포는 면역 학적 충돌을 배제하지 않는다. 탯줄 혈액 세포를 이식 한 후 첫 해 말까지 급성 백혈병의 재발 사례의 26 %에서 발견된다.

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