혈액 속의 비타민 A

혈청 내 비타민 A (레티놀) 농도의 기준치 (기준) : 1-6 세 어린이 - 0.7-1.5 μmol / l, 7-12 세 - 0.91-1.71 μmol / l, 13 -19 년 - 0,91-2,51 μmol / l; 성인의 경우 1.05-2.09 μmol / l입니다.

비타민 A는 지용성에 관한 두 가지 형태로 존재한다 - 실제 비타민 A 또는 레티놀 (동물성 제품에서 발견) 카로틴 알려진 프로 비타민 A가 벽에 레티놀로 변환 할 수있다 (동 식물성 기원으로부터 제조 됨) 소화관. 약 레티놀 수신 식품 50-90 %가 소장에서 흡수가 레티놀 팔미 테이트의 형태로 저장되어있는 간으로 복합체와 관련된 킬로 미크론으로 반송된다. 원한다면,이 레티놀의 형태로 혈류로 방출되어, 비타민 A 결합 단백질과 결합한다. 혈청 내에서 비타민 A 결합 단백질 + 레티놀 복합체는 트란스 타이 레틴 (transthyretin)에 결합합니다. 혈청으로부터 레티놀은 망막 광 수용체 및 상피와 같은 표적 세포에 의해 포획된다.

요구 사항을 초과하는 양으로, 비타민 A의 본문 (180-430의 연령, 성별 및 생리적 상태에 따라 하루에 레티놀 마이크로 그램), 간에서의 과잉이 비타민의 저장소를 형성하는 증착되는 경우. 음식에서 레티놀 섭취를 줄이면 간장이 혈류로 방출되어 혈청 레티놀 농도가 정상 수준 (0.7 μmol / L 이상)으로 유지됩니다. 생물학적으로 활성 인 다른 형태의 비타민 A (레티 날 및 레티노 산)는 매우 낮은 농도 (0.35 μmol / L 이하)로 혈액에 존재합니다. 레티놀 에스테르는 총 비타민 A (0.1-0.1 μmol / l)의 약 5 %를 차지합니다.

비타민 A는 산화 환원 과정에서 중요한 역할을합니다. 레티놀은 간과 근육에 글리코겐의 형성을 촉진 혈중 콜레스테롤은 스테로이드 성 호르몬의 합성에 관여 향상시킵니다. 그것은 성장 로돕신의 뼈 골격 재 합성의 형성을 위해 필요하며 또한 화생, 각화증 과도한 벗기 예방, 점막 및 피부의 커버 상피의 정상적인 기능에 기여한다. 비타민 A는 모발, 치아 및 잇몸을 강화시키는 데 도움이됩니다. 최근에, 암의 예방 및 면역 조절에서 비타민 A의 다양한 역할을 나타낸다 (식세포의 완성을위한 필수적인, IG의 합성을 증가 킬러 T 세포의 생성을 자극하고, II 등에 티 - 헬퍼 형태를 자극한다.). 비타민 A - 활성 항산화 제로서 주로 비타민 E가있는 상태에서 작용합니다. 그것은 산화로부터 비타민 C를 보호합니다. 비타민 A 결핍은 악성 신 생물의 위험 인자로 간주됩니다. 실험 연구에서 다이어트에 비타민 A의 함량이 증가하여 17.5 %의 평균 기대 수명이 증가하는 것으로 나타났습니다. 아연은 비타민 A 대사의 필수적인 보조 인자입니다 (비타민 A 결합 단백질의 합성에 필요합니다).

1 - 모유 수유에 대한 1.5 밀리그램 (5000 IU) - 레티놀 성인의 일일 평균 요구 사항 (20-50년)는 1.2 mg의 임신 여성을위한 (4.000 IU는 1 IU는 레티놀의 0.3 마이크로 그램에 해당)이었다 60 mg 이상 - 2.5 mg (10,000 IU)의 경우 8 mg (6000 IU). 레티놀의 일일 요구량의 적어도 1/3은 기성품 형태로 신체에 전달되어야합니다. 나머지는 레티놀이 체내에 형성되는 카로티노이드 (carotenoids)의 사용에 의해 흡수 될 수있다. 식품에 들어있는 레티놀의 약 30 %가 열처리로 인해 파괴된다는 사실을 염두에 두어야합니다. 레티놀의 활동은 카로틴보다 2 배 더 높으며, 또한 후자는 장에 30-40 % 만 흡수됩니다. 따라서식이 섭취량을 평가할 때 1mg의 레티놀이 6mg의 카로티노이드에 해당하는 것으로 간주됩니다.

LA Anisimova의 수정에서 Bessey에 따른 혈청 내 레티놀 (비타민 A)과 카로티노이드 측정

방법의 원리

비타민 A와 카로티노이드의 결정은 알칼리성 알코올 용액에서 가수 분해 한 다음 유기 용매의 혼합물로 추출합니다.

시약

• 수산화 칼륨 (KOH) 11M 용액.
• 96 % 에틸 알코올.
• 96 % 에틸 알콜 중 수산화 칼륨 (KOH) 용액 1 M : 11 M KOH 용액 1 부피를 10 부피의 96 % 에틸 알콜과 혼합한다. 시약은 연구 당일에 준비됩니다. 혼합 중에 얼룩이 발생하면 사용 전에 알코올을 증류로 세척해야합니다.
• Xylol, hp.
• Oktan, h.ch.
• 크실렌 - 옥탄 혼합물 : 동일한 부피의 크실렌과 옥탄을 혼합하여 제조 됨.

조사는 분광 광도계로 수행됩니다.

비타민 A의 결정 과정

손가락에서 채취 한 혈액 (약 1ml)을 원심 분리기 라벨에 넣고 20-30 분 동안 따뜻한 물 (온도 40-45 ° C)이 담긴 유리 컵에 넣습니다. 혈청을 분리하기 위해 얇은 유리 막대를 사용하여 혈액 응고 물을 조심스럽게 튜브 모서리에 감아 서 3000rpm에서 10 분간 원심 분리합니다.

혈청 0.12ml를 취하여 응집 관에 옮긴 다음 1M 알콜 성 수산화 칼륨 용액 0.12ml를가한다. 내용물을주의 깊게 흔드십시오.

프로브가있는 시험관을 가수 분해를 위해 60 ° C의 온도에서 20 분 동안 수 욕조에 둔다.

시료를 냉각시키고 크실렌 - 옥탄 혼합물 0.12ml를 넣고 10-15 초 동안 격렬하게 흔들어 준다. 다시 식히고 원심 분리하십시오.

고무 캔이있는 파스퇴르 피펫으로 비타민 A와 카로티노이드가 포함 된 상단 레이어를 조심스럽게 제거하고 마이크로 큐벳으로 옮깁니다.

샘플은 328 nm의 파장에서 분광 광도계를 사용하여 비타민 A를 결정하고 460 nm의 파장에서 카로티노이드를 결정합니다.

측정법 후 연구 샘플 액체로 가득 조사는 큐벳의 일부를 노출하도록 상기 석영 microcuvettes 세트 (살균제) 램프에서 15-20 cm의 거리에서, 이러한 목적을 위해 비타민 A. 파괴 자외선에 노출되고; 45~60분의 노출 시간.

샘플은 328 nm의 파장에서 반복적으로 분광 광도계를 사용합니다. 비타민 A의 함량은 비타민 A에 대해 Bessey가 계산 한 계수 (계수) 637을 고려하여 멸종 값 (광학 밀도)의 차이로 결정됩니다.

계산은 다음 공식에 따라 수행됩니다.

X = 637 × (ε328 (1) - ε328 (2)),

여기서 X는 비타민 A 함량, μg / dL; 637은 Bessey가 비타민 A를 측정하기 위해 계산 한 계수이다. Е328 (1) - 조사 전의 용액의 광학 밀도. E328 (2)는 조사 후 용액의 광학 밀도이다.

μg / dL에서 μmol / l의 비타민 A 농도를 전송하는 계수는 0.035입니다.

카로티노이드의 함량은 다음 공식에 의해 계산됩니다 :

X = 480-μ480,

여기서 X는 카로티노이드의 함량, μg / dL; 480은 Bessey가 카로티노이드를 결정하기 위해 계산 한 계수입니다. E480은 시험 용액의 광학 밀도입니다.

참고 :

Bessey에 따르면, 연구 중 더 크거나 작은 혈청 용량을 취할 수 있지만, 알콜 용액의 부피비는 크실렌 - 옥탄 혼합물의 부피 (양)의 변화에 따라 일정해야합니다.

혈청 내 비타민 A 함량의 표준은 : 신생아 및 영아에서 - 160-270 μg / l; 성인에서 1.05-2.45 μmol / l (300-700 μg / l). 성인 혈청 내 카로티노이드 함량은 800-2300 μg / l입니다.